Método Enzimaimunoensaio

Princípio do Teste

Neste método, os padrões de ferrritina, amostras de pacientes ou controles são primeiro adicionados às cavidades revestidas por estreptavidina. Um anticorpo monoclonal biotinilado (específico para ferrritina) é adicionado e os reagentes misturados. O resultado da reação entre o anticorpo biotinilado de ferritina e a ferritina nativa é um imunocomplexo que se deposita na cavidade revestida por estreptavidina. O excesso de proteínas séricas é retirado através da etapa de lavagem. Outro anticorpo específico para a ferritina, marcado com uma enzima é adicionado às cavidades. O anticorpo marcado se liga à ferritina já imobilizada na cavidade. O excesso de enzima é lavado por uma etapa de lavagem. O substrato é adicionado e a reação entre a enzima e o substrato promove uma coloração cuja intensidade é diretamente proporcional à concentração de ferritina na amostra.
A utilização de vários padrões de referência com níveis conhecidos de ferritina permite a construção de uma curva de calibração. A partir da comparação com a curva, a concentração de ferritina em uma amostra pode ser correlacionada.

K-109 -1